Фемтосекундный перестраиваемый титан-сапфировый лазер Tiberius® Thorlabs был разработан в тесном сотрудничестве со специалистами Thorlabs в области биологических наук. Изготовленный собственными силами сотрудников Thorlabs, данный лазер является квинтессенцией обширного опыта компании в области оптического проектирования и высокоточного изготовления деталей.
Особенности
- Широкий диапазон перейстройки длины волны - от 720 до 1060 нм;
- Самая быстрая в отрасли скорость перестройки длины волны - до 4000 нм/с;
- Высокая выходная мощность - >2,3 Вт при 800 нм;
- Сверхбыстрые импульсы длительностью 140 фс;
- Компактные размеры в половину от занимаемого пространства конкурирующими лазерами;
- Встроенный спектрометр для диагностики в реальном времени;
- Циркулирующий насос чистого воздуха продувает лазерный резонатор для плавной настройки через линии поглощения воды.
Области применения
- Многоканальные флуоресцентные изображения трехмерных объемов;
- Фотостимуляция;
- Визуализация без меток с помощью многофотонной автофлуоресценции и генерации второй гармоники.
Этот двухфотонный перестраиваемый лазер имеет среднюю мощность более 2.3 Вт при 800 нм и диапазон перестройки от 720 нм до 1060 нм, что позволяет пользователю выделять конкретные соединения для двухфотонной флуоресцентной визуализации и фотостимуляции.
Перестраиваемый фемтосекундный титан-сапфировый лазер Tiberius® Thorlabs излучает импульсы длительностью 140 фс. Относительно узкая спектральная полоса пропускания этих импульсов была выбрана таким образом, чтобы уменьшить уширение импульса, вызванное ячейками Поккельса и другими дисперсионными элементами, при этом обеспечивая высокую интенсивность пика излучения для двухфотонного возбуждения.
Так как пространство на рабочем столе пользователя обычно ограничено, фемтосекундный лазер Tiberius имеет конструкцию, которая сводит к минимуму площадь, занимаемую лазером на оптическом столе. При своих габаритных размерах 746.3 мм x 190.0 мм занимаемое пространство лазером Tiberius на оптическом столе составляет примерно половину от площади занимаемой конкурирующими с ним лазерами, сохраняя ценное рабочее пространство для остальной части Вашей экспериментальной установки. В комплект поставки каждого лазера Tiberius также входит лазерный контроллер, лазерный контроллер накачки, блок охлаждения и блок циркуляции чистого воздуха.
Чертеж титан-сапфирового лазера Tiberius
Для работы лазера пользователю предоставляется интуитивно понятный графический интерфейс, который информирует о средней длине волны и выходной мощности излучения лазера, используя встроенный спектрометр для обеспечения в реальном времени диагностики спектрального положения и формы импульса. Программируемые пользователем кнопки обеспечивают доступ одним щелчком компьютерной мыши к часто используемым длинам волн возбуждения. Кроме того, перестраиваемый фемтосекундный титан-сапфировый лазер Tiberius интегрирован с программным обеспечением ThorImage®LS, обеспечивая плавное и синхронизированное управление для экспериментов по фотоактивации и высокоскоростной визуализации в реальном времени. Перестраиваемый фемтосекундный титан-сапфировый лазер Tiberius можно использовать с мультифотонными микроскопами серии Bergamo® II Thorlabs для двухфотонной визуализации.
Графический интерфейс пользователя для управления лазером Tiberius
Улучшение контраста изображения благодаря быстрой перестройке длины волны
Благодаря ведущей в отрасли скорости перестройки длины волны излучения до 4000 нм/с перестраиваемый фемтосекундный титан-сапфировый лазер Tiberius идеально подходит для быстрой последовательной визуализации. Возможность быстрой перестройки лазера Tiberius позволяет получать высококонтрастные изображения при использовании в многоцветных мультифотонных микроскопах.
Быстрое переключение между двумя оптимизированными длинами волн возбуждения имеет несколько преимуществ по сравнению с возбуждением с одной длиной волны. К ним относится гораздо более высокая контрастность изображения, обеспечиваемая быстрым переключением и способность максимизировать флуоресценцию при более низких мощностях возбуждения, что снижает риск фотообесцвечивания образца.
Рис. 1. Приведенное выше изображение было получено с использованием одноволнового возбуждения на 788 нм, тогда как оптимальные длины волн возбуждения для двух меток составляют 750 нм и 850 нм.
Рис. 2 Быстрое переключение между оптимальными длинами волн возбуждения 750 нм и 835 нм обеспечивает высокую контрастность, видимую на этом составном изображении. Скорость съемки: 7 кадров в секунду.
Рисунки 1 и 2 иллюстрируют увеличенную контрастность изображения, получаемую путем визуализации нескольких флуорофоров в образце с использованием быстрой последовательной визуализации. Образец представляет собой сагиттальный срез 25 мкм мозга взрослой крысы. Красный канал соответствует флуоресценции анти-нейрофиламента цыплят, которая оптимально возбуждается при 835 нм, в то время как зеленый канал соответствует флуоресценции анти-GFAP мыши, которая оптимально возбуждается при 750 нм. На рисунке 1 показана флуоресценция от возбуждения одной длины волны при 788 нм, которая суб-оптимально возбуждает две метки одновременно. Рисунок 2 представляет собой составное изображение флуоресценции из двухцветной последовательности изображений возбуждения при скорости 7 к/с путем быстрой перестройки между длинами волн возбуждения 750 нм и 835 нм, которые оптимально возбуждают обе метки.
Видео: Переключение длины волны с использованием титан-сапфирового лазера Tiberius на 1/16 фактической скорости
Видео показывает быстрое переключение между красной и зеленой флуоресценцией как в режиме реального времени, так и на 1/16 скорости визуализации, что облегчает просмотр деталей каждой из них. Двухканальный набор изображений был собран со скоростью 7 кадров в секунду с разрешением 512 x 512 пикселей. Функция быстрой перестройки длины волны возбуждения фемтосекундного лазера Tiberius легко интегрируется в программное обеспечение ThorImage®LS, обеспечивая синхронизированное управление для экспериментов по фотоактивации и высокоскоростной визуализации в реальном времени в миллисекундных временных масштабах с использованием того же лазера.
Исследование структуры с помощью мультифотонной визуализации
Мультифотонная микроскопия использует преимущества окон прозрачности в ближней инфракрасной области в живой ткани и сильно локализованного возбуждения для создания многоканальных флуоресцентных 3D изображений. По сравнению с видимым светом, который используется в обычной широкопольной микроскопии и конфокальной микроскопии, свет в ближней инфракрасной области спектра обеспечивает значительно меньшее рассеивание и поглощение биологическими соединениями, что приводит к более глубокому проникновению во внутренние структуры под поверхностью.
Изображение глаза плодовой мушки демонстрирует способность перестраиваемого фемтосекундного титан-сапфирового лазера Tiberius различать морфологические признаки. Это двухканальное изображение содержит GFP-меченные фоторецепторы и немеченые области, которые демонстрируют многофотонную автофлуоресценцию. Для получения данного изображения длина волны возбуждения составляла 770 нм и использовался объектив 25X, NA 1,05 Olympus.
Товар бывает в наличии на нашем складе в РФ крайне редко. Из-за высокой стоимости и специфических характеристик высокотехнологического оборудования в большинстве случаев оно отсутствует и на складе самого производителя, так как производится под конкретный заказ.
Недорогие расходные материалы и дополнительные комплектующие, пользующиеся популярностью, производятся в значительном количестве и могут быть отправлены нам нашими поставщиками в течение пары дней после получения оплаты по инвойсу.
1. Наличие товара на складе производителя и срок его производства;
Если товара нет на складе производителя, срок производства высокотехнологичного оборудования, как правило, составляет от трех до шести недель. Производство сложных комплексных систем может занимать больше времени.
2. Время на доставку груза в РФ;
Срок доставки груза в РФ зависит от его веса и габаритов. Если груз небольшой, то он летит самолетом, что занимает один-три дня до таможенного склада. Если вес груза измеряется сотнями килограммов, то он плывет кораблем в пределах месяца.
3. Срок прохождения таможенного контроля.
Данный этап занимает до 10 дней. В случае непредвиденных обстоятельств процесс таможенного оформления может затянутся на месяц и больше.
Срок поставки комплектующих Thorlabs занимает от 4 недель.
В этой статье обсуждаются основные принципы микроскопии мультифотонного возбуждения, преимущества и недостатки использования данного метода в лазерной сканирующей микроскопии. Чтобы показать эффективность этого метода и продемонстрировать его ограничения рассмотрение ведется с практической точки зрения. В конце представлены некоторые эксперименты, проведение которых стало возможным лишь благодаря двухфотонной микроскопии.