Компания Chroma Technology занимается разработкой и изготовлением оптических фильтров уже более 20 лет и отлично понимает потребности своих клиентов. Специализированные наборы фильтров Chroma, оптимизированные под конкретные приложения, учитывают все распространенные проблемы пользователей и значительно облегчают процесс визуализации.
Дополнительный запирающий фильтр в наборе
Поскольку TIRF микроскопия основана на явлении полного внутреннего отражения возбуждающего лазерного луча, используемые для данных задач запирающие фильтры должны ослаблять огромное количество лазерного излучения, возвращающегося через линзу объектива микроскопа. Отношение сигнала освещения / флуоресценции может достигать 1015:1. Один хороший запирающий фильтр может обеспечить оптическую плотность OD6-OD7. Поэтому для оптимального качества изображения требуется дополнительная блокировка лазерного луча. Как этого добиться?
Chroma Technology продумала все за вас! Полные наборы фильтров для TIRF микроскопии от Chroma содержат дополнительный запирающий фильтр, подобранный для получения максимально возможного отношения сигнал / шум в вашем эксперименте.
Идеально плоские дихроичные фильтры
Дихроичные зеркала Chroma UltraFlat, установленные в запатентованные металлические кубы фильтров для TIRF, обеспечивают отражение лазеров без искажений, что дает вам возможность создавать идеальные затухающие волны.
Плоскостность поверхности дихроичных фильтров для TIRF играет крайне важную роль, так как даже самые незначительные искажения поверхности могут привести к астигматизму и ухудшению качества визуализации.
Дихроичные фильтры UltraFlat от Chroma имеют отклонение поверхности от плоскости всего менее половины длины волны света на дюйм поверхности. Это позволяет отражать лазер без искажений, преобразуя больше энергии в эффективную затухающую волну и посылая меньше лазерных фотонов в образец.
Флуоресценция от шариков за пределами TIRF-области
Изображения получены в режиме TIRF с помощью лазера 561 нм, объектива 60x и набора фильтров со стандартным дихроичным фильтром толщиной 1 мм в стандартном кубе от производителя микроскопа. Изображение Z-проекции - стек из 39 оптических срезов по 100 нм намного выше зоны TIRF (2.1 –6.0 мкм над покровным стеклом). Образец состоял из 200 нм микросфер TetraSpeck Microspheres™ в агарозе на покровном стекле. |
Что вы должны увидеть за пределами зоны TIRF? Ничего! Изображения получены со специальным набором TIRF-фильтров Chroma с 2 мм дихроичным фильтром UltraFlat™ в металлическом кубе фильтров. Тот же образец, идентичные условия визуализации и обработки. Ни один из шариков не генерирует флуоресценцию. Если TIRF достигается должным образом, возбуждение строго ограничивается областью затухающей волны, <200 нм над границей раздела стекло / среда. |
Фиксация дихроичных фильтров в кубе может вызвать нежелательные деформации, которые приведут к искажению профиля отраженного лазерного луча. Запатентованные металлические кубы фильтров Chroma Technology для TIRF гарантируют установку фильтров без напряжения для создания идеальных затухающих волн.
Для получения технических консультаций, а также по вопросам приобретения оптических фильтров Chroma Technology обращайтесь к представителям компании АЗИМУТ ФОТОНИКС.